Das Museum und die Gallerie Borghese beherbergen haupsächlich Gegenstände aus der privaten Sammlung von Kardinal Scipione Borghese. Auf Wunsch der Besucher wurden viele Meisterwerde der Renaissance und klassischen Neuzeit (Berini´s und Della Porta´s) wie Canovas berühmten Portrait von Paolina Borghese, und Gemälde der größten italienischen und ausländischen Künstler des 17 und 18 Jahrhunderts ausgestellt.
Um ein Beispiel zu nennen: Der David mit dem Kopf von Goliath von Caravaggio, bei dem der Kopf des Riesen ein Selbstportrait des Künstlers ist. Außerdem wurden viele der Räume von berühmten Künstlern dekoriert. Schade ist es nur, das Napoleon einen Großteil von Prinz Camillo Borghese (Paulines Ehemann) Sammlung zum Louvre transportierte als der Jüngere seine Sammlung seinem Schwager übergab.
Die Gallerie Borghese ist nicht die einzige Attraktion im grünen der Villa Borghese, nicht weit weg lässt sich das Etruskische Museum der Villa Giulia und die Schule der modernen Kunst finden.
